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討論串[求救] WB後壓出來的band很weak
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Re: [求救] WB後壓出來的band很weak
推噓2(2推 0噓 5→)留言7則，0人參與, 最新作者martyrtitan (Martyrs)時間13年前 (2013/01/11 09:15), 編輯資訊
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蛋白量高不代表一定可以壓得出來. 重點在於有沒有轉漬過去. 因為tubulin和actin含量很高. 所以很容易染出來. 拿CBR染一下膠 Poncea S染膜. 就知道到底轉漬的完不完全. 我自己抓條件 Hoefer 10*10的. 450mA 都要20小時才轉的稍為乾淨 (25ug protei
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[求救] WB後壓出來的band很weak
推噓4(4推 0噓 12→)留言16則，0人參與, 最新作者jajshigogo (唉唷喂~)時間13年前 (2013/01/10 16:36), 編輯資訊
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最近在做WB, protein濃度已經下到200ug了,. 結果band還是很weak, 就算是壓tubulin, 也不是很明顯. 步驟大概是跑完gel將protein transfer到PVDF membrane後,. 用1:5000下一抗(兩種抗體同時壓, 其中一個是tubulin),. 室溫作
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