討論串[求救] 請問his tag的純化方法
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推噓5(5推 0噓 2→)留言7則,0人參與, 最新作者championelmo (elmo軒)時間14年前 (2010/07/09 18:12), 編輯資訊
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實驗室第一次要做enzyme assay. 我們手上拿的載體是pET-32系列 又有在改過. 之前再做western blot時使用的抗體是有專一性很高的 S-protein kit. 有抓到 有顯示出band. 之後因為要做純化 為了省錢就選用his tag. 以plasmid map來看 我們的
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推噓1(1推 0噓 0→)留言1則,0人參與, 最新作者jamesc123 (勇者無懼)時間14年前 (2010/07/12 12:04), 編輯資訊
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可能的原因很多. 如果是採用 his tag純化的話. 或許可以試試在Western Blotting時使用anti-his tag antibody測試his tag. 是否有被擋住. 如果his tag沒有問題的話. 那可能是單純的表現量不夠. 解決辦法就像版友回的以量取勝. 多養一些菌液以增加
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