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討論串[求救]EMSA基礎問題
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#3
Re: [求救]EMSA基礎問題
推噓1(1推 0噓 2→)留言3則，0人參與, 最新作者aborwang (Abor)時間17年前 (2009/03/19 01:53), 編輯資訊
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1.我做過DNA probe約200bp的，一般而言是20~200皆可. 但如果你probe片段長，用的protein又是cell lysate. 那可能需要用agarose gel才看的到，因孔徑較大，. 不過一般都是polyacrylamide gel. 2.網路上有許多免費的protocol，
(還有126個字)
#2
Re: [求救]EMSA基礎問題
推噓1(1推 0噓 0→)留言1則，0人參與, 最新作者tsubasawolfy (悠久の翼)時間17年前 (2009/03/18 13:50), 編輯資訊
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20-40 bp. 最佳25-30poly dI dC:. 去掉non-specific protein. 因為核內有許多DNA binding protein. 所以要加入non-specific oligo防止non-specifc protein黏到target protein上. cold
(還有283個字)
#1
[求救]EMSA基礎問題
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者reteporeh (被實驗中)時間17年前 (2009/03/18 11:29), 編輯資訊
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目前要進行EMSA的實驗因為之前沒做過. 鄰近的實驗室也沒有相關的實驗技術可以詢問. 所以只好來這請問各位前輩. 1. 去做protein-DNA interaction 的DNA probe的序列長度有限制嗎？或者有最佳長度?. 2. 我看protocol 有加poly dI dC 也有加cold
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