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討論串[求救] IHC/Biotin & DNA
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#3
Re: [求救] IHC/Biotin & DNA
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者Rodrigo (另一場奮鬥的開始)時間17年前 (2009/02/26 20:20), 編輯資訊
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重新敘述問題.... 冷凍切片的組織是有perfusion過的背根神經節. PBS wash都是5~10 min X3. H2O2 → Blocking(goat serum) → anti-G-CSFR → FITC antibody. ↓. biotinated antibody → ABC →
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#2
Re: [求救] IHC/Biotin & DNA
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者Asialin ( )時間17年前 (2009/02/25 10:11), 編輯資訊
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這個不太可能. 雖然沒有染過神經. 不過就我用ABC system的經驗是沒碰過在細胞核有non-specific binding. 通常ABC system會有的非專一性染色問題. 是在肝臟或腎臟等有大量endogenous biotin的場合. 一抗有時也是非專一性共染的元兇. 建議你做一個no
#1
[求救] IHC/Biotin & DNA
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者Rodrigo (另一場奮鬥的開始)時間17年前 (2009/02/24 22:36), 編輯資訊
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冷凍切片是背根神經節. 染G-CSFR. 然後用ABC. 最後用DAB. 屢次發現染出的切片. Neuron的細胞核呈現淡染. 這是正常應該出現的. 但是其他細胞也被染到. 而且很明顯. 特別深的都是細胞核. 但胞質並沒有被染到. 如何把那些不該出現的深染細胞核消除?. 以下是我的猜測. 似乎Bio
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