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討論串[求救] 關於小分子蛋白的western blot
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#1
[求救] 關於小分子蛋白的western blot
推噓9(9推 0噓 6→)留言15則，0人參與, 5年前最新作者tsk (:~)時間15年前 (2009/02/16 22:06), 編輯資訊
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請問一下板上的先進們. 我有一個target protein 他分子量只有6kD左右. 在跑western的時候總是看不到小分子的蛋白質. 因為total protein是從組織粹出來的 所以比較雜. 就想說用15%的膠來跑. 可是transfer後就都hybrid不到 15kD以下的蛋白都很乾淨
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#2
Re: [求救] 關於小分子蛋白的western blot
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者boblu.時間15年前 (2009/02/17 04:25), 編輯資訊
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你有沒有先用 coomassie blue 染你的 membrane 確定是不是 transfer 的問題. 確定是的話. 別忘了 transfer buffer 的配方是要視你要染的蛋白質大小不同而調整的. 詳細配方去查講抗體實驗技術的書應該都會有. 大原則是 分子量越小 SDS 要減少, 甲醇要
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#3
Re: [求救] 關於小分子蛋白的western blot
推噓1(1推 0噓 0→)留言1則，0人參與, 最新作者boblu.時間15年前 (2009/02/17 04:35), 編輯資訊
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另外. 抗體實驗技術的書籍 個人推薦這兩本：. http://www.amazon.com/Using-Antibodies-Laboratory-Portable-Protocol/. dp/0879695447/ref=pd_bbs_sr_2?ie=UTF8&s=books&qid=123481
(還有142個字)
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