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討論串[求救]請問PCR products用restriction enzymeꐠ…
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唔...根據以前的經驗 通常primer dimer不會多長. 跑膠時跑久一點就可以比較明顯的分出了. 而且應該要先check primer sequence是否會形成dimer. 然後根據下文的condition. 我覺得primer濃度可以再下降些. 我們實驗室是以總體積20μl primer濃
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你可能要先克服無法做高濃度Agarose gel的問題. 這應該很快解決 可能先問問附近有做分生的實驗室吧. 不然把困難處po在這裡也可以. 其實你的198bp產物和primer應該用2%就可以分開了. 你的實驗重點是在用酵素切之前就要先確定沒有剩餘的primer的存在. 不然到時候可能無法區分切完
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10x dNTP 3,Template DNA 2 這兩個可以少ㄧ點不過你已經可以做出來. 那就不用改了不然出不來又麻煩了. 使用restrition enzyme: PCR products 5,water 16.4,10x Buffer 2 不過兩個情況都太少ㄧ點. 除非你的product 粉濃
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