討論串[求救] 如何可以大量的養菌??
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推噓1(1推 0噓 0→)留言1則,0人參與, 最新作者boblu.時間18年前 (2007/12/07 23:15), 編輯資訊
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引述《umbrally.bbs@ptt.cc (成長)》之銘言:. > 我有一個clone 是接在puc18上. > 所以要抽取此plasmid 就要大量的養菌. > 但是養菌只能一管一管的養. > 也就是說 如果我要很大量的此clone. > 我就要養很多管的菌. > 請問有什麼方法可以更快速
(還有1151個字)

推噓0(0推 0噓 0→)留言0則,0人參與, 最新作者yuchipeter (彼得)時間18年前 (2007/12/07 21:19), 編輯資訊
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先養3ml 菌液. 隔天用1L 錐形瓶 裝滅菌的150-200ml TB. 接1ml-2ml 菌液 下去養16-20小時. 用這個菌液抽大量 (Viogen or Qiagen). 應該有400ug plasmid以上. 祝好運. 一小管一小管養菌比較不實際. 寧可 200ml 養四次,. 細菌可以

推噓2(2推 0噓 3→)留言5則,0人參與, 最新作者umbrally (成長)時間18年前 (2007/12/07 16:30), 編輯資訊
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感謝推文回答我的人^^. 我在養菌的時候 原本是用接種環碰一下菌就可以. 但是這一次我不只把LBA加倍 連菌我都加20λ. 但是也沒有長比較多. 我用的菌是E.coli 這樣. 還是說真的要用很多的錐形瓶養 才會變多嗎??. 謝謝~~. --. 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ Fr

推噓1(1推 0噓 0→)留言1則,0人參與, 最新作者tsubasawolfy (悠久の翼)時間18年前 (2007/12/06 18:32), 編輯資訊
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先養小管菌 抽一小部份確認無誤後先放4度C.... 拿錐形瓶配250mL的LB (塞上海棉拿去autoclave) 降溫後加入antibiotic. 再加入小管養的菌1mL...37度C 16Hr. 再來就去跟廠商買抽Maxi的kit..至於哪家廠商好 目前用過QIAGENE,Genemark. 感
(還有5個字)

推噓6(6推 0噓 2→)留言8則,0人參與, 最新作者umbrally (成長)時間18年前 (2007/12/06 16:39), 編輯資訊
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我有一個clone 是接在puc18上. 所以要抽取此plasmid 就要大量的養菌. 但是養菌只能一管一管的養. 也就是說 如果我要很大量的此clone. 我就要養很多管的菌. 請問有什麼方法可以更快速且更大量的使菌生長抽plasmid. 我有想過把養菌的LBA量加倍. 但是長出來的菌沒有變多.
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