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討論串[問題] 關於northern的問題
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#4
Re: [問題] 關於northern的問題
推噓1(1推 0噓 0→)留言1則，0人參與, 最新作者tinapig (提那豬)時間18年前 (2007/08/12 17:41), 編輯資訊
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以前我做northern時,. transfer完是到暗暗的地方... 用手提UV燈照（印象中也是254nm）. 看看有沒有18S, 28S rRNA. （我的sample是真核細胞total RNA,所以可以看到18S跟28S rRNA）. 可以大概看一下loading是否一致,. 還可以labe
(還有18個字)
#3
Re: [問題] 關於northern的問題
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者kirby0415時間18年前 (2007/08/12 13:10), 編輯資訊
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嗯 對~gel是用formamide做的. 我EtBr是等到transfer完,把壓的扁扁的膠拿去外染. 是有看到一些尚未transfer過去的sample. 但應該佔當初loading sample的極少量. 而我拿membrane去UV box. 以254nm的UV去crosslink 5分鐘.
#2
Re: [問題] 關於northern的問題
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者leftt (left)時間18年前 (2007/08/11 22:48), 編輯資訊
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我以前用過molecular cloning的古典法做過. 你用哪種gel跑? formamide嗎?. 跑電泳的時候有加上一點點EtBr吧. 一個偷吃步. transfer完偷偷在紫外燈上看一下就知道膜上有沒有東西了. 不然唷 照一下你transfer後扁扁的gel渣. 看看有沒有很多殘留 也可以
#1
[問題] 關於northern的問題
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者kirby0415時間18年前 (2007/08/11 16:36), 編輯資訊
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因為我們實驗室做northern並不是用kit去做. 而是用自己配的buffer 還有實驗方法. 我現在遇到了一個問題. 就是我想去看我transfer以及crosslink後. RNA到底有沒有確實crosslink到nylon membrane上. 在網路上有查了資料. 好像可以用methyle
(還有79個字)
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