討論串(共8篇) - [問題] subculture後,cell在dish上分布不均勻 - 看板Biotech

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討論串[問題] subculture後,cell在dish上分布不均勻

共 8 篇文章

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推噓0(0推 )留言0則，0人參與作者studyno1 (汲取知識)時間18年前 (2007/05/01 20:17)資訊

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^^^^^^^^^^^^^^^^^^^請問這步驟是specific for MEF 嗎?. 從大學到碩班老師學長姐教subculture都沒有這個步驟耶. 都是加完trypsin-EDTA後RT靜待一下(或放incubator一會兒) 然後輕拍dish. 或是直接用pipet把細胞沖下來收集細胞

推噓0(0推 )留言0則，0人參與作者boyo (29大頭)時間18年前 (2007/05/01 19:14)資訊

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MEF是mouse embryonic fibroblast吧. 你的作法是不是漏了一步??. MEF大部分的用途是用作ES cell的feeder. 所以MEF貼dish貼平均非常重要貼不平均你的ES cell就很容易分化. 你加medium的用途是要inactivate trypsin的作用.

推噓0(0推 )留言0則，0人參與作者studyno1 (汲取知識)時間18年前 (2007/05/01 18:16)資訊

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我養的是MEF cell 今天早上subculture. 剛剛看了一下發現我沒有把細胞均勻分布在dish中. 所以有些區域細胞較多有些就很少. 我的方法是先將適當體積的medium 加在dish. resuspend trypsin作用後的cell後再依適當的spilt ratio. 取出細胞

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