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討論串[求救] 純化蛋白
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[求救] 純化蛋白
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者wkj1020 (Aj)時間17年前 (2007/04/13 20:23), 編輯資訊
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我將GST fusion的蛋白用GST column純化後(粗估2mg以上). 用amicon濃縮 再去過anion exchange column. 結果發現蛋白在flow through就掉下來了. 我查了sequence的pI 是6.8多. 而我的buffer pH 是7.4. (Tris-H
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#2
[求救] 純化蛋白
推噓7(7推 0噓 38→)留言45則，0人參與, 最新作者skywings28 (CPU)時間8年前 (2015/09/01 01:53), 8年前編輯資訊
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目前自己用E.coli產帶有His tag的protein. 因此會利用Ni+ affinity beads去抓下來. 主要步驟為. 1. 15ml sample跟beads(50ul)在旋轉盤binding O/N. 2. 利用column(空的)把beads留住. 3. 用10mM 10ml i
(還有333個字)
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