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討論串[問題] 請問IP的抗體
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#4
Re: [問題] 請問IP的抗體
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者robertkoch (為什麼要暱稱)時間19年前 (2007/03/30 20:01), 編輯資訊
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因為在跑 SDS-PAGE 前會把樣品離心去上清液(詳情不詳述了). 然後加入 loading buffer 和 B-ME 再拿去煮 80度 8分鐘. 這個時後許多鍵結都斷了. IP antibody 的 Fc 就跑出來鬧了^_^. 這一題好難. 可能要問你老師. 因為不知道你要作 positive
(還有82個字)
#3
Re: [問題] 請問IP的抗體
推噓1(1推 0噓 0→)留言1則，0人參與, 最新作者mikis1107 (mikis1107)時間19年前 (2007/03/30 14:27), 編輯資訊
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喔喔喔我懂了. 嗯我的分子是大約34kD左右. 應該是ok的. 我試試好了. 真的是太謝謝您了. 那再請問一下. 1. 我做IP所用的beats是protein A. 他不是會跟IP antibody結合嗎(2抗的功用)?. 那為什麼還會有IP antibody的Fc跑出來呢?. 2. Contro
(還有123個字)
#2
Re: [問題] 請問IP的抗體
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者robertkoch (為什麼要暱稱)時間19年前 (2007/03/27 01:24), 編輯資訊
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要用不一樣比較好. 因為加二抗時認的是一抗的 Fc. 如果連 IP 也有一樣的 Fc. 那會有辨認錯誤的狀況發生. 結果會變成有磷酸化和無磷酸化訊號差別不大. (Fc:Antibody 的尾端). 另一種狀況是有跑 SDS-PAGE. 此時的 IP 用的 Antibody 的 heavy chain
(還有174個字)
#1
[問題] 請問IP的抗體
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者mikis1107 (mikis1107)時間19年前 (2007/03/26 12:08), 編輯資訊
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請問IP實驗中. 先用Rabbit的抗體將目標蛋白質抓下來後. 想要看他的磷酸化反應. 那此時用的WB anti-phophoXX的抗體. 是不是要用非rabbit的抗體呢?. 還是兩種一樣是rabbit也可以呢?. --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From: 163.29
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