[求救] 求救 medium不小心加熱到62度能用嗎？

看板Biotech作者 (Dawn)時間2年前 (2022/01/03 16:14), 2年前編輯推噓11(11推 0噓 33→)
留言44則, 13人參與, 2年前最新討論串1/2 (看更多)
養細胞用的medium/DMEM+10%FBS 剛剛準備繼代，使用前用水浴槽加熱 我們的水浴槽是壞的（無法恆溫） 會一路一直升溫 （從20度到40度約5分鐘） （40度到60度不到十分鐘） 因為忘記按計時器去關掉 剛剛一路從室溫20度加熱到62度 在62度時被我發現 請問這樣medium還能用嗎？ 謝謝 補充：有聽說去補體是56度30分鐘 我的medium從56度升到62度應該只有三分鐘 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.128.144.64 (臺灣) ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1641197688.A.BC1.html
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01/03 19:22, 2年前 , 1F
可以取一點medium出來養養看
01/03 19:22, 1F
好的！謝謝
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01/03 20:06, 2年前 , 2F
看你養什麼細胞，239T的話我想是沒問題
01/03 20:06, 2F
推
01/04 01:44, 2年前 , 3F
同一樓 這個最簡單
01/04 01:44, 3F
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01/04 01:44, 2年前 , 4F
或是就直接丟了 省得後續實驗問題抓不完
01/04 01:44, 4F
也是 總比日後有問題還要懷疑medium
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01/04 02:41, 2年前 , 5F
如果你這個 medium 是要做 assay 的，建議你換新的；如
01/04 02:41, 5F
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01/04 02:44, 2年前 , 6F
果是純粹拿來 maintain culture，我覺得還好，頂多補 1
01/04 02:44, 6F
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01/04 02:45, 2年前 , 7F
倍 glutamine；不過除非你這罐體積很大(超過500 mL)，
01/04 02:45, 7F
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01/04 02:46, 2年前 , 8F
實驗室又很摳，不然的確倒掉配新的最安全。
01/04 02:46, 8F
了解！最後決定換掉了 謝謝
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01/04 17:27, 2年前 , 9F
一台水浴槽沒多少錢, 換一台吧
01/04 17:27, 9F
推
01/04 17:50, 2年前 , 10F
1. 配新的，不要浪費時間去測試
01/04 17:50, 10F
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01/04 17:50, 2年前 , 11F
2. 快換一台水浴槽，實驗室沒經費叫老師自己掏錢買
01/04 17:50, 11F
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01/04 17:52, 2年前 , 12F
省錢不是這樣省的….
01/04 17:52, 12F
老師其實知道這件事==
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01/04 18:15, 2年前 , 13F
拿來當wash buffer,或是細胞detach後拿去離心前當trypsin
01/04 18:15, 13F
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01/04 18:16, 2年前 , 14F
neutralization buffer
01/04 18:16, 14F
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01/04 18:20, 2年前 , 15F
以這加熱速度,62度應該也不是medium裡面的溫度
01/04 18:20, 15F
對！我也是這樣想的！但是避免疙瘩還是換掉了
推
01/04 21:07, 2年前 , 16F
弱弱的問 medium這樣溫度過高對細胞生長會有特別的影響
01/04 21:07, 16F
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01/04 21:07, 2年前 , 17F
嗎
01/04 21:07, 17F
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01/04 23:59, 2年前 , 18F
Medium base 本身的 glutamine 高溫容易降解，如果已
01/04 23:59, 18F
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01/04 23:59, 2年前 , 19F
經加了 serum，serum中的 growth factors 有可能回變
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01/04 23:59, 2年前 , 20F
性失去作用導致細胞缺乏生長訊號而死亡。現在其實只要
01/04 23:59, 20F
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01/04 23:59, 2年前 , 21F
不是做免疫相關、對補體敏感的細胞培養，都還建議連56
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01/04 23:59, 2年前 , 22F
度30分鐘的去補體都不要做了
01/04 23:59, 22F
推
01/05 16:37, 2年前 , 23F
Medium也曾經被別人用56度煮半個小時，繼續養Cancer ce
01/05 16:37, 23F
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01/05 16:37, 2年前 , 24F
ll，他們還是長得很好
01/05 16:37, 24F
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01/05 16:38, 2年前 , 25F
推agagy，擔心的話拿來咖細胞吧!
01/05 16:38, 25F
推
01/05 17:18, 2年前 , 26F
丟了啦!!不要鬧了!!
01/05 17:18, 26F
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01/05 17:22, 2年前 , 27F
你之後養出來做的實驗數據你會想要加註這條嗎?
01/05 17:22, 27F
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01/05 17:22, 2年前 , 28F
看推文發現做實驗這麼不嚴謹的人還真多耶 = =!!
01/05 17:22, 28F
推
01/05 17:31, 2年前 , 29F
剛好用這件事跟PI要求說換一台新的啦!!不然還會再發生
01/05 17:31, 29F
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01/05 17:58, 2年前 , 30F
真的要嚴謹，就直接 define medium 了，用FBS本身就已
01/05 17:58, 30F
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01/05 17:59, 2年前 , 31F
經是不嚴謹的事了(切身體會過換一批FBS就完全做不出來
01/05 17:59, 31F
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01/05 17:59, 2年前 , 32F
的痛苦)，然後樓上說的，用這件事去跟老闆說要換，只會
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01/05 18:00, 2年前 , 33F
被老闆罵說在旁邊好好顧就好，自己不專心怪誰！
01/05 18:00, 33F
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01/05 18:01, 2年前 , 34F
我覺得要不是他們實驗室就是這麼摳，原PO也不會因為這
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01/05 18:01, 2年前 , 35F
點小事跑上來問吧
01/05 18:01, 35F
你好專業，也好瞭解實驗室生態歐 謝謝你以上的建議
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01/05 18:28, 2年前 , 36F
之前換了一批FBS之後MEL就無法分化了，嚴重的甚至養不活
01/05 18:28, 36F
好的謝謝
推
01/05 20:36, 2年前 , 37F
讚成拿來洗細胞或去活trypsin
01/05 20:36, 37F
好的謝謝
推
01/05 20:37, 2年前 , 38F
不知道原PO是養什麼細胞，cell line可能還好，本身就強壯
01/05 20:37, 38F
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01/05 20:38, 2年前 , 39F
養primary cell 可能直接死給你看..growth factor都失活了
01/05 20:38, 39F
推
01/05 20:40, 2年前 , 40F
話說 以前養細胞除了做soft agar culture之外 medium
01/05 20:40, 40F
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01/05 20:40, 2年前 , 41F
我都是冰箱拿出來避光放室溫就用了
01/05 20:40, 41F
※ 編輯: dawnga (49.215.34.219 臺灣), 01/06/2022 01:25:28
推
01/08 00:17, 2年前 , 42F
FBS只要實驗都用同一批號哪會不嚴謹...
01/08 00:17, 42F
推
01/29 09:52, 2年前 , 43F
我學弟之前不小心放在學姊設好要設補體的56度裡至少半小
01/29 09:52, 43F
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01/29 09:52, 2年前 , 44F
時，後來我提醒他趕快拿出來，還是能用ㄟ
01/29 09:52, 44F
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