[求救] 老鼠皮膚組織western

看板Biotech作者 (77823)時間6年前 (2018/04/02 21:25), 5年前編輯推噓4(4推 0噓 5→)
留言9則, 5人參與, 6年前最新討論串1/2 (看更多)
想請問版上各位學長姐 把裸鼠皮膚拿去磨之後配好sample去跑western但b-actin卻不準 和實驗室學長姐討論過 覺得可能是一開始在剪皮膚時沒把黏在皮膚下的膜拿掉 導致脂肪影響actin(因為當初萃取完組織的蛋白時上面浮著一堆雜質，就算離心也無法分離 想請問這樣有什麼解決的辦法 沒做過動物實驗還請各位學長姐幫幫忙! 謝謝!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 36.234.10.116 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1522675507.A.571.html
推
04/03 00:35, 6年前 , 1F
用ImageJ定量beta actin之後逆定量回去
04/03 00:35, 1F
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04/03 01:00, 6年前 , 2F
文中也沒提到怎麼(有沒有)測濃度定量...
04/03 01:00, 2F
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04/03 01:13, 6年前 , 3F
如果最後真的沒有解決辦法會用c大的方法的，謝謝！
04/03 01:13, 3F
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04/03 01:13, 6年前 , 4F
有的！有定量
04/03 01:13, 4F
推
04/03 10:12, 6年前 , 5F
加dye後多離心幾次把上層白色油脂去掉
04/03 10:12, 5F
好的會試看看！謝謝你
推
04/03 13:31, 6年前 , 6F
想問 定量時是離完後直接取一點上清；還是會取出全部
04/03 13:31, 6F
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04/03 13:31, 6年前 , 7F
的上清，混合一下再定量？
04/03 13:31, 7F
我們離完心後取出全部上清 從中取一些來定量及配蛋白 ※ 編輯: es77823 (120.110.127.195), 04/03/2018 13:42:33 ※ 編輯: es77823 (120.110.127.195), 04/03/2018 13:48:58
推
04/03 21:44, 6年前 , 8F
可能是不同組的 actin量本來就不同？ 換個 ctrl / 直
04/03 21:44, 8F
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04/03 21:44, 6年前 , 9F
接用 CMB染 membrane看總蛋白量?
04/03 21:44, 9F
我們是小鼠皮膚分成四部分，做4種處理，cmb..我會再去問看看實驗室學長姐！ ※ 編輯: es77823 (1.168.87.251), 04/03/2018 22:03:55 ※ 編輯: es77823 (111.82.226.73), 07/26/2018 02:04:16
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