Re: [求救] primer單位換算

看板Biotech作者 (雜碎。)時間9年前 (2014/08/23 19:17), 編輯推噓2(200)
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※ 引述《jernie (jernie)》之銘言: : ※ 引述《jernie (jernie)》之銘言: : : 不好意思! 問個蠢問題 : : 如果買來的primer用245ul ddH20 溶解 Final stock 是100mM : : 若用165ul ddH20 溶解 Final stock 是165ug/ul : : Primer 的mw 6490 : : 但是最近要做site-directed mutagenesis, protocol上的primer是1.25 μl (125 ng) : : of oligonucleotide control prime , 請問要怎麼計算? : : (以上數據是假設的,因為primer還沒來) : Primer 100mM要如何换算成125ng : (1.25ng/ul) 照你給的條件 我給兩個算法 算法一 高中化學法 100mM = 0.1 M = 0.1 mol/L = (6490 * 0.1) g/L 125 nG = 1.25 * 10^-7 g = V * 649 g/L V = [(1.25 * 10^-7) / 649] L = (1.25*10^-1)/649 / uL = 0.000192 uL 算法二 目標濃度換算(ref. Stratagene quikchange manual p.6) X (pmole) = 125/6490 * 1000 = 19.3 pmole V * 100mM = 19.3 pmole V = (19.3/100) pmole/mM = 0.000193 uL 不過一般我們primer stock都是回溶成100uM 不知道你為什麼會訂到這麼大量 是一般人的1000倍 下面開放戰ip -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.112.60.93 ※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1408792624.A.C9C.html

08/25 10:31, , 1F
小魯我以前就是用上面兩種硬算的 讚
08/25 10:31, 1F

08/27 13:42, , 2F
我用final 0.2uM 可以mutant成功
08/27 13:42, 2F
文章代碼(AID): #1J-7WmoS (Biotech)
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