[求救] PCR primer帶有GGC重覆的序列

看板Biotech作者MDCCLXXVI (1776)時間10年前 (2014/04/17 18:57)推噓1(1推 0噓 3→)

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最近要在一段蛋白質前面加上GGGGS四重覆的linker 所以5' primer帶有下面的序列: ggcggcggcggcagcggcggcggcggcagcggcggcggcggcagc 但將PCR(用phusion polymerase,band很乾淨)產物clone定序後，發現在linker中的序列有deletion(少10幾個mer) 因為不同clone的deletion都不一樣，所以應該不是primer合錯了想過是不是GC-rich造成的二級結構所影響所以打算用下面的方式試試看 1. 用phusion polymerase GC buffer for GC-rich template 或 2. 加DMSO 請問有人有類似的經驗嗎? thx~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 203.64.48.9 ※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1397732259.A.BD8.html ※ 編輯: MDCCLXXVI (203.64.48.9), 04/17/2014 19:03:08

推

bluesnow1122

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