[求救] MTT測不出存活率

看板Biotech作者 (YOBO!)時間11年前 (2013/05/27 16:21), 編輯推噓4(407)
留言11則, 6人參與, 最新討論串1/1
呃 不好意思想請教一下各位板友! 最近做實驗想要看我的樣品(植物的萃取物)對細胞的存活率影響 不過發現到如果在高劑量的組別 細胞數量會明顯的減少 (這部分我另外貼dish觀察型態時發現) 或者是要加DMSO溶結晶紫的步驟前有先在顯微鏡底下看 高劑量處理組結晶紫的數目是明顯比控制組少很多 不過加入DMSO之後~ 最後測得的吸光值跟控制組都差不多 (吸光大約在0.9~1.1之間) 我猜測是否有可能在高劑量的濃度下樣品對細胞有毒性 但同時也可能對粒線體的酵素有影響 所以造成有細胞較少 不過最後吸光值不受影響測不出存活率上的差異~ 有這可能嗎??? 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.130.90.195

05/27 17:43, , 1F
MTT本來就不是很靈敏的測試方法,換個方法吧~
05/27 17:43, 1F

05/27 17:44, , 2F
現在很多儀器可以數細胞,算存活率,功能都滿強大的~
05/27 17:44, 2F

05/27 18:21, , 3F
也許是結晶紫沒有被溶出來,我用37度shaking 10min
05/27 18:21, 3F

05/27 22:19, , 4F
我們家也是做這方面的,紫色結晶看似很多,但實際上沒那
05/27 22:19, 4F

05/27 22:20, , 5F
麼多! 高劑量細胞會死,尤其是你的藥有顏色,也會干擾mtt
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05/27 22:20, , 6F
分析
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05/27 22:21, , 7F
可以改用xtt 那種螢光染劑,可以避開藥物顏色干擾== 不過
05/27 22:21, 7F

05/27 22:21, , 8F
我們實驗室沒錢沒得買~
05/27 22:21, 8F

05/28 02:20, , 9F
吸光在0.2-0.8之間比較準 超過太多飽和了 就不準了
05/28 02:20, 9F

05/28 19:07, , 10F
wst-1無毒性又簡單操作
05/28 19:07, 10F

06/02 01:49, , 11F
改MTS試試
06/02 01:49, 11F
文章代碼(AID): #1HenU19T (Biotech)