Re: [求救] 混合癌細胞打入老鼠實驗
※ 引述《belly0529 (顆顆)》之銘言：
: 各位好，最近需要做老鼠的實驗
: 因為是第一次做這樣實驗，所以有些問題想請教
: 1.許多資料寫matrigel(濃度10mg/ml)混medium比例為1:1
: 意思是我數完細胞(如果取1*10^7這樣的細胞數會不會太少?)
: 假設細胞液需要取100ul那matrigel同樣取100ul
: 之後將混和的200ul皮下注射到老鼠體內這樣嗎?
: 2.另外想請教的是我有爬過文
: 有位版友有些說明我不是很懂
: 他說在數完細胞以後取需要的量然後離心再將細胞混和matrigel
: 想請問為什麼還要再次離心?那離心之後需要吸掉上清液嗎?
: 可是如果離心了，這樣我就不懂第一點matrigel混medium比例為1:1的意思了
: 麻煩有經驗的版友可以告知或是提供建議，真的非常感謝
不是很確定你的問題
試著回答看看，有錯煩請其他版友指正
簡單說你要確認的點有兩個
1.你的實驗要打多少細胞到老鼠身上
2.打進去體積要多少
確認這兩點之後，把要打的細胞處理好數細胞
假設你要打50μl體積，10^6個細胞進去，但你數出來的細胞濃度是10^7/ml
可是這樣如果要取得10^6的細胞，光原始體積就100μl超過50μl
這時候可以用2裡面的方式，先吸100μl的細胞讓總細胞數達到10^6
離心去掉上清液後，用50μl的matrigel與medium 1:1混合液回溶
讓細胞最後回溶在1比1的matrigel, medium裡即可
換言之，2是因為細胞濃度低於打進去的目標濃度，所以用離心濃縮的方式調整
假設你的細胞濃度高於你設定要打的濃度，也可以用稀釋的
一般而言，動物實驗一次都會做頗多隻，盡量每隻的條件也要一致
所以用離心的方式再回溶到混合液是比較乾脆而且一致的方法
因為你每批處理的細胞由於生長狀況不同，處理完細胞濃度可能不同
如果用稀釋達到需求細胞濃度，最終體積可能會不一樣
倒不如用離心的調整就好
不曉得這樣有沒有回答到你的問題
另外，要打細胞的話請注意針的粗細，太細細胞會破掉
請去查詢應該用幾號針注射
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