[求救] Lipofectamine 細胞毒性原因是 ?

看板Biotech作者 (Wengda)時間13年前 (2013/03/19 02:44), 編輯推噓6(6推 0噓 19→)
留言25則, 7人參與, 最新討論串1/1
我的指導教授 ~ 要我比較一下 TurboFect和Lipofectamine的差異 ! 我是比較想要改用 Turbofect 啦 我是養CHO-K1 一樣的條件下 Lipofectamine 真的會讓細胞死亡 ..... 而且 TurboFect 操作好像更簡化 又便宜一些 .... 以上不是打廣告文 >"< 我想要問一下各位先進 大家都說 Lipofectamine對細胞有毒性 ~ 但毒性的原因是甚麼機制造成的 ? 是 Lipofectamine 無法被細胞分解 ? 還是形成的complex太大 導致細胞膜不穩定之類的 !? (有看到有人寫說 Lipofectamine/DNA complex 大於500nm, 那請問Turbofect/DNA 形成的complex是小到大約是多小) 我還想追加一下問題 Lipofectamine藉由細胞膜融合以及endocytosis進入細胞中 ~ 那他的endomosolysis是如何發生的 ! 因為Turobofect是利用proton-sponge effect自endosome中脫逃出來 ! 那Lipofectamine的機制是 ? 還有Lipofectamine為何在serum會不穩定 ? 是因為帶正電會和蛋白質產生作用嗎 ? 如果是 為何帶正電的polymer不會產生作用 是因為聚合物比較穩定嗎 ? 我也不知道 是哪種 polymer 有先進知道嗎 還是這是商業機密 ? 最後 請問我們教授一直叫我找 Lipofectamine和Turbofect兩者之間的人家做的分析給他看 ~ 比如說 為什麼人家會捨棄 Lipofectamine 而改用 Turbofect ! 請問這種分析哪裡找的到阿 ? 我到NCBI跟GOOGLE都找不到類似的比較 ? Thermo官網應該也沒有特別把兩者產品做一對一的全部比較 ... 我把一般網路上 找到的資訊以及 我本來試用的經驗跟他說 ~ 他完全不採用 !! 除了一般的細胞毒性較低 步驟簡單 以及不用管serum 跟價格比較便宜之外 ~ 我還有問進階說 那轉型的效率以及表達出蛋白的時間是否有很大的差異 ~ 得到的回答 都是沒有 ~ 我把原理跟教授報告過後以及以上的優點跟他解釋後 ! 他還是完全不能接受 .... 我真的不太了解 還有甚麼分析要找給他看 ! -- 男人和女人要用一株名叫Couple synthetase的酵素催化成Couple ~ 這株Synthetase是需要愛心，關心和耐心當做Energy ~ 其攜帶的Coenzyme是Destiny。 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 1.164.154.202
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03/19 09:51, , 1F
我個人覺得,不需要浪費太多時間在這種產品比較上面,
03/19 09:51, 1F
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03/19 09:52, , 2F
反正你自己比較過,覺得哪個好用就用哪個.
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03/19 09:52, , 3F
花太多時間在比較這種"工具",對你的論文並沒有幫助~
03/19 09:52, 3F
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03/19 10:13, , 4F
除非你論文題目做這個 不然工具只要合用就好
03/19 10:13, 4F
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03/19 12:15, , 5F
問題在於 教授找我麻煩阿 >"<
03/19 12:15, 5F
推
03/19 13:15, , 6F
你必須要先確認,教授要的是甚麼? 他真的很在乎這個嗎?
03/19 13:15, 6F
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03/19 13:15, , 7F
不然你的問題,我以前做的時候也都查過,也都找得到資料~
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03/19 13:16, , 8F
但我不知道你的教授是不是不接受你所查到的資料.
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03/19 13:17, , 9F
根據以前所查,liposome的毒性是較polymer高,也較易受serum
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03/19 13:18, , 10F
所影響. Turbofect雖號稱不受serum影響,但根據我自己實驗
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03/19 13:18, , 11F
結果,不加serum還是比較好,只是差別沒有很大.
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03/19 13:20, , 12F
但liposome的transfection效率似乎還是略高一點.
03/19 13:20, 12F
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03/19 20:40, , 13F
問產品專員呢?
03/19 20:40, 13F
推
03/19 23:08, , 14F
我用Turbo送不了150k的DNA 但Liposome可以
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03/19 23:09, , 15F
我也覺得如果本業不是做這個 原理google一下
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03/19 23:10, , 16F
知道就OK了 去深究實在不是甚麼好事
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03/19 23:10, , 17F
要分析的數據 找產品專員應該OK啦
03/19 23:10, 17F
推
03/20 09:25, , 18F
你老闆是真的想知道兩者實驗資料的差別還是他傾向用 lipo？
03/20 09:25, 18F
推
03/20 09:27, , 19F
如果他是傾向用 lipofectamine，那就用吧
03/20 09:27, 19F
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03/20 09:28, , 20F
除非用 lipofectamine 會導致實驗完全做不出來
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03/20 09:29, , 21F
不然你也可以兩個做 side by side，讓他自行判斷
03/20 09:29, 21F
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03/20 09:31, , 22F
reagent 的差異難有高下之分，使用習慣的影響有時還比較大
03/20 09:31, 22F
推
03/20 09:58, , 23F
我也覺得你老闆想用lipo,可能不想多一個變因，就一直延用
03/20 09:58, 23F
推
03/20 14:34, , 24F
看能不能請業務幫你申請試用品，兩者一起比較，讓證據說話就
03/20 14:34, 24F
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03/20 14:35, , 25F
對了...比一直找書面原理有說服力
03/20 14:35, 25F
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