[求救] MTT assay
不好意思,上來請教一下
目前我做的實驗是以光動力治療產生自由基來殺死癌細胞(hela cell)
seed在96 well裡,每格5000個,養兩天後加藥
實驗組別有
1.medium裡加入亞甲基藍,放回培養箱2hr後拿出來打雷射4分鐘(光動力治療組)
2.一樣是加入亞甲基藍,但是不打雷射(測單純藥物暗毒性組)
3.什麼都不做(control group)
目前我是在下藥後的隔一天才拿出來做MTT assay
但做了好幾次結果都跳動很大不如預期
我在想隔一天才做MTT會不會隔太久,
可能光動力治療後死掉的細胞也沒那麼多,隔天就又長滿了
但又怕太早做的話,細胞還沒死透,這樣測出來會不準
據我所知,光動力治療會induce cell apoptosis
而MTT是靠測量粒線體活性來反映細胞活性
請問若細胞已經開始aptosis的話,粒線體會馬上失去活性嗎?
還是要等到later stage的時候才會呢?
查了好幾篇相關paper關於這方面的細節都沒有詳述
學長姐們做的實驗方向也跟我不太一樣,愛莫能助
所以只好上來求救了
謝謝幫忙~"~
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