Re: [求救] 為何細胞要先 pretreat 藥劑, 然後再刺激
※ 引述《konnankonnan (天使海豚)》之銘言：
: 想請問一下..
: 之前看到一些文章, 會將 inhibitor 與癌細胞 (A549) 先進行培養 30 分鐘
: 然後再用刺激劑 (例如: PMA)誘導某個蛋白質表現 (caspase 或 COX-2),
: 之後會利用 Western blotting 或其它方法分析 caspase 或 COX-2 的表現
: 我想請問的是...
: (1)將 inhibitor 與細胞先進行培養的目的為何 ?
文章內應該會說明是何種inhibitor，可能是防止某條傳遞路徑活化
或是避免某種已知的caspase or COX-2調控蛋白活化，以排除作者實驗結果上的其他可能
: (2)為何時間是 30 分鐘, 而不是其它時間, 例如 12 小時 ?
處理時間應該是要看inhibitor的效果，端看作者所抓的條件
: (3)加入刺激劑之前, 細胞要先 wash 嗎 ?
這部份應該可以看文章裡的materials & methods....
: (4)如果是懸浮型細胞, 像是: Jurkat cell, 要如何處理 ?
如果你是指wash的部份，一般可以先離心再將培養液吸掉，
再重新加入還有藥劑的培養液繼續培養
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◆ From: 163.25.89.48
推
12/05 01:02, , 1F
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