Re: [求救] 關於JC-1染mitochondria
※ 引述《yak138 (yak138)》之銘言：
: 各位好~
: 最近利用JC-1來染mitochondria的時候遇到一些問題
: 在將JC-1由stock solution (溶於DMSO)
: dilute成working solution的時候 (溶於medium或PBS)
: 發覺溶解度很差 既使vortex過後 仍然可以看到許多不溶解的顆粒
: 加上所觀察到的染色結果不是很好 推測可能染劑無法進入細胞內
: (用的sample是單細胞藻類)
: 不知道有沒有這方面有經驗的人 可以給小弟一點建議~
: 謝謝~
我目前也在使用JC-1這個染劑 不過使用CCCP (附贈的positive control)
做了之後 發現綠光及紅光均減少(我使用的方法是流式細胞儀)
而沒有protocol所說的綠光增加 紅光減弱的現象
雖然我查到有些paper是寫紅光減弱 綠光不變但是我的兩種波長的光是都減弱=="
無意中看到這篇的推文想說有沒有可能是因為綠光degrate掉了?
我從染色開始的protocol大概是:
染JC-1 37度 35mins => wash 一次 => 用PBS回溶入flow管中
當中離心機我是設定4度C 回溶之後flow管也是插在冰上直到上機
請問一下這過程中有問題嗎? 還是因為我手腳太慢?
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