[閒聊] SDS-PAGE可以配兩個不同濃度替代梯度嗎?

看板Biotech作者 (玻璃做的大叔)時間12年前 (2012/03/03 20:45), 編輯推噓5(505)
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就是如果同時要分大分子和小分子的蛋白的話,通常要跑梯度膠。除了premade, 自己配就要有特殊的裝置,一個沒弄好,還沒加到電泳片就凝固了。我突然想到 能不能separating gel就配兩種濃度,譬如下面先加一半的20%,同樣先壓平, 但第二步不是stacking,而是8%的separating gel,之後照舊。 這算是我的異想天開,雖然沒試過,不過大家覺得可行嗎? -- 太初有道,道與耶和華同在,道就是耶和華。這道太初與耶和華同在。 萬物乃藉祂所造,凡被造的沒有一樣不是藉著祂所造的。生命在祂裡頭, 這生命就是人的光。光照在黑暗裡,黑暗卻不接受光。 吾輩乃生於黑暗,行於黑暗。因神之指引,行向光明;又因撒旦誘惑,回歸黑暗。 我不斷地徘徊於光明與黑暗之間,從被造之日至今,又自今直到那審判之日的來臨。 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 180.176.35.108

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可以阿!!
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我可以想到不同濃度間會有分界線,但不曉得會不會有不良影響
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還是說高濃度還沒凝固就直接加低濃度的膠?
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03/03 22:43, , 4F
這應該不算異想天開吧,這做法不是早就有了嗎???
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03/03 23:23, , 5F
真的嗎?我是沒看過有人這樣做啦!有沒有特別的注意事項?
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會不均勻 每次做 擴散的程度會不一樣
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可以跑 我有做過 但是很難拿捏兩種%的高度
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我常這樣跑 ok的
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一直這樣跑阿,不過兩層下膠體積不用各半,視情況調整很方便
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03/07 14:45, , 10F
跑比較長的垂直電泳槽不就可以區分開來
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文章代碼(AID): #1FKX9rfH (Biotech)
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