[討論] 跑WB的蛋白質樣品-20可以保存多久?

看板Biotech作者 (ラルクは信仰)時間12年前 (2012/01/02 00:21), 編輯推噓6(6推 0噓 10→)
留言16則, 8人參與, 最新討論串1/2 (看更多)
想請問一下 大家的樣品sample buffer處理後 通常冰在-20可以保存多久?? 另外通常可以結凍解凍幾次?? 因為最近WB一直作不出來 同樣的sample 之前都還跑得很清楚 但最近(12月) 不論transfer o/n 重配1抗2抗 或 1抗 o/n 甚至loading 100ug 去跑 還是跑不出來 不論是磷酸化的蛋白或是total的都跑不出來 都快去撞牆了 WB作不出來的可能原因實在太多了 想請問大家的經驗 希望能稍為排除一下可能原因 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 203.77.65.129
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01/02 01:38, , 1F
通常我放3個月就會明顯感受到訊號減弱 但有神人一年樣本
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01/02 01:39, , 2F
跑起來還是很威 只能說看個人
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推
01/02 06:56, , 3F
每一部作control試試看原因吧 最近還碰過機器壞掉的
01/02 06:56, 3F
推
01/02 11:39, , 4F
想順便請問大家,大家覺得protein用SB處理過後保存比較好,還
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01/02 11:40, , 5F
是直接凍在-80,要跑WB前再用SB處理比較好,謝謝~
01/02 11:40, 5F
推
01/02 13:50, , 6F
SB和加熱處理後 protein都變性 而且如果有加inhibitor
01/02 13:50, 6F
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01/02 13:50, , 7F
理論上是還滿穩定的...
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01/02 13:50, , 8F
我現在是先定量一批跑internal control
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01/02 13:51, , 9F
如果沒變 那我就分管以sample buffer處理後冰-20
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推
01/04 00:24, , 10F
有沒有一個確定的positive control可以用?
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01/04 00:29, , 11F
另外,是只有你或是少數人做不出來,還是所有人都這樣?
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01/04 00:30, , 12F
是的話,check一下2抗及substrate
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推
01/05 03:04, , 13F
加laemmli buffer煮過之後放-70至少可以放一年
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01/05 08:50, , 14F
了解~ 謝謝各位的回答
01/05 08:50, 14F
推
01/06 17:48, , 15F
可以藉標題問SB是啥嗎@@?
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01/06 18:53, , 16F
SB=sample buffer
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文章代碼(AID): #1F08V-Z9 (Biotech)
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