[求救] MDCK cell泡在PBS中脫落
這個問題困擾我蠻長一段時間了...我做plaque assay多於一盤時，就會一次只處理一盤
（目前最多只有做到三盤）但時間掌握好像有點問題，細胞總是會掉下來
1.先將第一盤medium移除，以1x含Ca和Mg的PBS wash
2.搖晃後移除PBS，用顯微鏡觀察細胞有無掉落
3.沒掉落，再加PBS wash第二次
此時先讓細胞泡在PBS中，去處理第二盤（助教操作時曾讓細胞泡在PBS中，沒事）
4.將第二盤medium移除，以1x含Ca和Mg的PBS wash
5.搖晃後移除PBS，用顯微鏡觀察細胞有無掉落
6.沒掉落，再加PBS wash第二次
7.將第一盤的PBS移除，用顯微鏡觀察
此時，靠well 左側的細胞有的皺縮有的掉落了一大片（通常是12 well左邊兩排 ）
8.把藥物和病毒下到第一盤cell
9.將第二盤的PBS移除，用顯微鏡觀察
也發生了同樣的掉落情形
之前大概都是這樣，這次更嚴重，不只兩排掉，幾乎所有well都掉...不過這次因為
時間緣故，細胞數沒有之前滿我就下了，大概是85%滿||||
應該要接近95~100%滿，但細胞還不到擠的程度下病毒
但老闆說PBS不可能造成這樣的狀況（還沒跟她說滿度問題）
而且就算會掉，我掉的方向也和她以前看過的不同邊@@"
（我是左手略抬高12 well，讓PBS流到右側後吸乾，此時最左兩排細胞掉落的地方
不受PBS的覆蓋）
我想到的只有細胞數和PBS的問題="=
想請問細胞如果是全滿的，又不讓它泡在PBS中（加入搖晃後立刻移除，不吸得很乾，
表面看起來有水光）是否應該可以解除細胞掉落情形？
還是只要是全滿，就算泡在PBS中（顯微鏡觀察一盤頂多三分鐘），應該也不會有影響？
煩請有經驗的板友幫我想想＆解答吧，一直浪費耗材空做不是辦法啊>"<
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