[求救] Hela怎麼養都養不起來>"<

看板Biotech作者 (sitting)時間15年前 (2011/02/18 14:09), 編輯推噓7(7推 0噓 13→)
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我家的HeLa一直養不起來>"< 每次到養到第三天就會開始有一大堆的死細胞飄起來(應該) 一開始以為是medium汙染,test後確認medium沒有汙染 在前一代凍細胞時,因為incubator不穩定所以健康狀況好像就不太好了... 現在incubator修好了,可是還是養不起T^T 我家medium是DMEM+10%FBS+0.1%getamicin 不知道大家能不能給我一點意見呢>"< 細胞在養不起來我就畢不了業了T^T 謝謝大家 ※ 編輯: sitting200 來自: 140.114.97.178 (02/18 14:10)
推
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汙染的可能性很大,因為HeLa相當好養~ test凍起來的細胞
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推
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microplasma contamination?
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凍細胞&解凍細胞的過程有正確嗎?
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黴醬菌應該不會讓細胞大量死亡~
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"myco"plasma
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推
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要不要試試別加Gentamicin?
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凍細胞我是先將離心完的cell用medium 懸浮後加5%DMSO
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解凍時我是從液態氮拿出來後,直接放37度水浴槽解凍
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然後加新的medium 10ml去洗DMSO,離心後再加新的10ml
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全部都加到dish裡養~
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目前都是在試凍起來的細胞,正打算試試不加gentamicin
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推
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解凍過程看起來沒甚麼問題,如果不是汙染的話,可能是因為
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凍起來的細胞本身就不太好,經過解凍後太虛弱而死亡~
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可以試看看解凍別批較健康的細胞~
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不過你說第三天才開始死亡..@@ 你還是應該先測試是否汙染?
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那大概要測哪一些汙染呢??因為這一批是第一批凍管= =a
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所以完全沒有其他批凍管T.T
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推
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DMSO水溶會放熱 DMSO要先和medium混好才能懸浮細胞
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推
02/18 23:46, , 19F
HeLa 就跟別的 lab 要來養看看就知道是不是你的問題了
02/18 23:46, 19F
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02/20 01:59, , 20F
恩恩~謝謝各位幫忙,我會再跟其他實驗室借HeLa試試
02/20 01:59, 20F
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