[討論] SDS-PAGE running buffer調pH?

看板Biotech作者 (WoWer)時間13年前 (2010/11/18 11:08), 編輯推噓5(5013)
留言18則, 7人參與, 最新討論串1/2 (看更多)
許多protocol跟各大廠說明書 都建議配置10X running buffer時不要調整pH 想請問各位家裡的會不會調整? 因為我之前跑2D是使用沒調整的來跑 解析度還不賴 而剛剛學妹配置的10X stock有使用HCl調整pH 很擔心會影響我2D-PAGE的解析度阿 T_T -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.116.25.228

11/18 12:27, , 1F
我沒有調...之前有助教說調pH你跑得時候就知道後果了
11/18 12:27, 1F

11/18 12:27, , 2F
但我沒嘗試過就是了....
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11/18 16:29, , 3F
我們之前配都沒調 沒出過什麼問題...
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11/18 16:58, , 4F
嗯我之前也都不調整的 但現在這個Lab某個人堅持要調整XD
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11/18 18:19, , 5F
我想請問這"某個人"堅持的理由跟根據為何??
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11/18 18:36, , 6F
他說之前都有調pH 所以以後也都該follow 讓我傻眼
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11/18 21:31, , 7F
可以泡兩批一個調一個不調pH, 稀釋成1倍後再測測看pH值.
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11/18 21:32, , 8F
我的經驗是說不要調的buffer, 稀釋後pH值才是對的.
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11/19 00:14, , 9F
這種buffer pH值你調了就知道 變1X後雖然還是準的
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11/19 00:14, , 10F
但是buffer能力會低下很多 長時間跑下去會更加明顯
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11/19 00:14, , 11F
為什麼我知道呢 因為之前lab有天兵真的去調過
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11/19 00:15, , 12F
結果好一陣子大家PAGE跑起來都超醜的
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11/19 00:16, , 13F
同理 DNA電泳buffer也是一樣 因為這個我也被學長唬過orz
11/19 00:16, 13F

11/19 10:09, , 14F
謝謝大家提供的經驗 我想我直接找老闆談談好了 囧
11/19 10:09, 14F

11/19 12:25, , 15F
case by case 每間lab實驗condition不同
11/19 12:25, 15F

11/19 12:26, , 16F
說不定你那間lab sample剛好就適用調完pH的buffer
11/19 12:26, 16F

11/19 12:28, , 17F
本來很穩定建立好的system 本就不應該隨意更動
11/19 12:28, 17F

11/19 12:29, , 18F
若是要test 應該就像genep大講的一樣 兩批做個測試
11/19 12:29, 18F
文章代碼(AID): #1Cv9YW_g (Biotech)
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