[求救] Ligation的cutting site接近
我在進行的實驗是將一段A基因約1kb
接入pCambia2301這個vector約13kb
所用的cutting site為BamHⅠ與XbaⅠ
所用的條件如下
Insert 10μl
Vector 4μl
bufferA 2μl
bufferB 2μl
Ligase 2μl 4℃反應overnight
做了數次卻接不起來
基本上我的A基因與vector都check過了
所以我在猜想
是否是因為我選用的這兩個cutting site相鄰
導致用酵素切的時候沒辦法兩端都切
不知版上有經驗的版友
有沒有遇過類似的問題
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 218.35.25.28
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