[問題] western blot band不均勻
※ [本文轉錄自 Biology 看板 #1CVvTXcN ]
作者: eatofy (平常心) 看板: Biology
標題: [問題] western blot band不均勻
時間: Thu Sep 2 20:23:58 2010
【問題】：western blot 再running時，靠近marker的well都會斜一邊。
壓完片後，每個well的band不均勻
我是用0.75的膠 runnung 100v 1hr
transfer 400A 1.5hr
全程on ice
【問題起因】：一開始以為是蛋白質定量的問題，一直再練習
現在定量都控制R^2 0.99。也有請學長幫我，照我定量
出來的配方，配sample。
但是，同一片膠，有我自己配的sample與學長配的sample
跑出來的band全部都不均勻，影像分析的結果當然是差異很大
(練習跑b actin)
【個人看法】：不太曉得是甚麼原因= =a 定量方面的R^2因該是沒問題
難道會是在loading 到well時出錯?
sample我是跑膠前天準備好，冰再-20，
跑膠前退冰、votex直接loading <===會是這問題嗎?
麻煩大家幫我解決? 謝謝
這是我壓出來的圖
http://0rz.tw/naJ50
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※ 編輯: eatofy 來自: 120.126.71.89 (09/05 23:03)
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