[求救] 請問有用SYBR SAFE染劑的高手

看板Biotech作者foxbat (霜夜焰蝠)時間15年前 (2010/06/15 23:17)推噓3(3推 0噓 5→)

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小弟在使用SYBR SAFE染劑時遭遇幾個大問題材料是LE agarose內染，每100mL加1uL染劑 PCR總反應體積10uL plant genomic DNA 50ng 鎂離子濃度2.5mM dNTP濃度0.3mM 酵素是用taq 首先是背景值過亮的問題一直無法改善雖然條帶看得見但後面一把油漆刷亮帶就是會讓整個照片不太好看是不影響判讀但老闆希望能投稿要有漂亮照片... 另外我發現若是電泳時間較長染劑似乎會有往負極跑的現象造成膠片上方亮、下方暗的情形再者SYBR SAFE染的條帶亮度好像跟EtBr比起來就是差了點雖說實驗室的系統是直接沿用UV燈+EtBr濾鏡不是SYBR SAFE最大激發波長但302nm也是另一個激發波峰只是比較小一點在無法更換照相系統的狀況下有沒有什麼方法可以讓染色效果更好的?? 或是有什麼其他安全染劑是也可以換著試試看的?? 小弟就是不想再用EtBr才會想要以安全染劑來替換有請板上眾實驗高手們救援感謝!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 122.126.141.236

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foxbat

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ordinary07

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ordinary07

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