Re: [求救] Transfomation做不出來><

看板Biotech作者 (洛)時間15年前 (2010/04/22 00:49), 編輯推噓0(000)
留言0則, 0人參與, 最新討論串1/1
實驗室其他人是否有使用上述protocol 以BL21&Rosatta 轉型成功?? 若沒有: 1.確定BL21 及 Rosatta 42度C heat shock 所需的準確時間(每株competent cell 各不相同,自行製備與商業販售也有差異) 2.是否需要額外條件?@ @ (這邊是附加的,看到stratagene販售的BL21 轉型時會 加2-ME,相當精采XD) 若有: 確定plasmid 是否乾淨。濃度可降低,通常總量10 ng ~ 50 ng /100 ul competent cell 已經足夠,有些trouble shooting 認為濃度太高會影響轉型效率。 祝順利!! 順便看到Rosatta 可以使用E coli 較少使用的tRNA codon來生產真核生物蛋白 也學習了不少以前沒注意過的東西XDDD -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.116.142.62
文章代碼(AID): #1Bpoo0MR (Biotech)