Re: [求救] Transfomation做不出來><
實驗室其他人是否有使用上述protocol 以BL21&Rosatta 轉型成功??
若沒有:
1.確定BL21 及 Rosatta 42度C heat shock 所需的準確時間(每株competent cell
各不相同,自行製備與商業販售也有差異)
2.是否需要額外條件?@ @ (這邊是附加的,看到stratagene販售的BL21 轉型時會
加2-ME,相當精采XD)
若有:
確定plasmid 是否乾淨。濃度可降低,通常總量10 ng ~ 50 ng /100 ul competent cell
已經足夠,有些trouble shooting 認為濃度太高會影響轉型效率。
祝順利!!
順便看到Rosatta 可以使用E coli 較少使用的tRNA codon來生產真核生物蛋白
也學習了不少以前沒注意過的東西XDDD
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