Re: [求救] 請問NHS EDC的用途及溶劑
※ 引述《coolmeow (誰能愛我100趴)》之銘言：
: 抱歉在這個版上問這好像很淺....
: 最近老師要作生物試片以測試實驗室自己架的光學機構 如...SPR 但尚無流道
: 我看了一些paper的步驟 但是實驗室實在沒有生醫基礎
: 所以有一些問題或許很蠢但是請各位包涵
: 1.請問NHS及EDC的在表面改質的步驟上到底有什麼樣的功能或目的?
: 2.NHS及EDC裡面都有CH"火巠"類 這樣算是有機物嗎? 所以他的溶劑是水還是乙醇呢?
: 3.我們使用的表面改質SAM是MHDA 有16個c的tail group 一端S 一端COOH基
: 請問這個東西真的只要"浸泡12小時"就可以接於Au表面嗎?
: 我對於這一點非常懷疑.........(有無需要考濾水溫或其他大氣壓力等因素)
: 4.我們使用生物分子為BSA 再請問BSA的溶劑"PBS"的成分有沒有所謂的標準
: 因為我們上了SIGMA買的成分是有PB 10mM + NaCl 138mM + KCl2.7mM
: 編號是P-3813 但是參考其他碩論或是paper 不是沒有詳細交代其過程成分
: 就是寫的太專業看不懂....囧. 所以我們先姑且買了這個來用
: 5.請問加入BSA時的PBS有沒有需要顧慮水溫或滅菌 有些paper好像說要體溫(37度)
: 但有些又沒有交代.....
: 6.有許多文章有提及tween啥的.... 請問這倒底是在幹嘛的呢
: 主要功能是......?
: 抱歉一下子問了一堆問題
: 拜託來個神人幫我解答吧 (跪求...)
好久沒有做實驗了，憑久遠的記憶試著幫你解答一下，如果有誤請大家鞭小力一點..
1.EDC和NHS是活化COOH基用的，EDC先和COOH基反應，然後再由NHS和這個基團反應，
最後變成 R-C=O -NHS的反應基團，接下來就可以和帶有 R2-NH2的基團反應，變更
穩定的 R-C=O -NH -R2 鍵結
2.NHS和EDC用水就可以溶解了
3.會啊，這就是所謂的Self assembly monolayer，可以去google一下相關原理，不過
如果我沒記錯，成不成功和水溫和壓力的因素不大，和碳鏈的長短和浸泡時間關係
比較大...
4.PBS就是phosphorate buffer saline，要選哪一種基本上和你未來的實驗設計比較
有關吧...
5.同4，和你實驗設計比較有關，不然隨便加一加也會溶解
6.Tween是一種介面活性劑，他是商品名，依照不同的特性有Tween-20，Tween-80...等
很多種類，主要是避免非特異性吸附用的...
希望對您有幫助，如果有誤也請其他神人補充改正一下...
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