Re: [問題] coomassie blue煮沸染色法
※ 引述《transmore (小次郎)》之銘言：
: ※ 引述《phyton (飛騰)》之銘言：
: : 我的作法是
: : 使用一般的 coomassie blue 染色液及去染液
: : 1/把 gel 丟到染液裏面
: : 2/微波爐煮
: : 3/去除染液 加醋酸洗一遍後泡醋酸
: : 4/微波爐煮
: : 5/丟一張半張擦手紙，放著搖
: : 6/搖到冷掉後微波爐加熱，擦手紙太藍了就換一張
: : 7/視情況更換或不更換醋酸洗液
: : 8/通常一個小時可以看到bands 半天可以退染得很漂亮
: 我的作法是..
: 染膠按照一般流程和配方
: 退染的時候直接把染好的膠放到水中(自來水就好)
: 然後拿去微波3-5分鐘
: 加熱到拿出來手會覺得微燙就好
: 不要燙到沒辦法用手直接拿盒子
: 接著把水倒掉換水再做一次
: 通常做個三次就夠了
: 大概20-30分鐘就可以退染完成
: 水量、加熱時間、微波爐的強度都可以調整
: 染劑可重複使用
: 效果不好的時候再換新的
我們實驗室的作法是老師在國外的作法
染膠的時候染劑加到蓋過膠片
微波爐微到手摸起來微溫 (不要覺得燙 這樣會有很酸的味道)
搖 15 min 看看可不可以看的到 band，如果不行就再做一次
退染的話把染劑倒掉 (都會回收)
先用自來水沖一下 把殘餘的染劑去掉
加退染劑蓋過去
也是微波到微溫 加一張擦手紙去搖
15 min 後就退的差不多了 如果要有漂亮的 background 就再做一次~
過去的經驗都還不錯
封片或掃片前泡自來水把味道洗掉 再用 50% MeOH 泡到縮到喜歡的大小
只要微波的時候有加蓋子 不要微得太熱
微波爐和 hood 聞起來都還好~
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* 人生就像被強暴 *
* 要嘛睜開眼睛反抗 *
* 要嘛閉上眼睛享受 * *
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推
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