Re: [求救] 收medium去跑western,maker變型了!
我也來猜一下
重點在於"濃縮"二字
medium用哪一種啊?
原本medium中是否含鹽 (請自己查囉)
sample經過濃縮後 鹽類大量累積
原作者在將濃縮後的sample去跑膠片 當然跑的亂七八糟 (跑膠前請desalting)
還有加了血清的culture medium 其中的成分 都來自血清裏的蛋白
因此跑膠後會很醜
個人意見 請參考
※ 引述《wenhaoshen (wenhaoshen)》之銘言：
: 我有一個問題，就是我要收細胞分泌到medium的x152蛋白質，
: 經過用含10%FBS medium培養CHO-K1三天後,
: 收集起來,並用0.22 um filter過濾及濃縮後,
: 拿去跑western, 結果跑膠造成旁邊的maker嚴重變形變很細,
: 而且size不準,
: 而且有些抗體hybrid結果都沒有出來
: 我是推斷是serum造成的,
: 但是無法用無serum的medium去養CHO細胞,
: 因為細胞這樣會死掉,
: 請問有經驗的學長姐該如何解決呢?
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※ 編輯: sonpaa2 來自: 140.112.5.16 (07/02 23:05)
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