[求救] 壓片問題
我最近在作壓片 實驗原理大約是 將有末端標記biotein的DNA序列
跑膠 20% polyacamide/8M urea gel transfer到膜上
然後用kit的方法strepavidin-HRT去冷光呈色
壓片在膜跟底片之間有隔一層保鮮膜 壓片時間約20分鐘
之後顯影 定影 每次壓出來的片子都超黑 黑到一種誇張的境界
換過新的定影顯影液 也換了新的底片 我是用白片
我不知道問題出在哪裡 每次做都是壓出來很黑很黑的片
要放在日光燈下才能看到我的band 我想請問 有可能是我哪步出問題?
顯影液配錯? 我是依照配方稀釋的 我配500c.c 我用109c.c的顯定影原液加水稀釋到500c.c
顯影時 大約20秒 看到片子變黑我就沖水之後泡定影液了
不過每次出來的片子是真的很黑 黑到幾乎不透光 實驗室有做過的人我有請教過
他說他也不知道 他沒壓過這麼黑的片子過 也從頭到尾帶我做過依次
請問板上有經驗的各位大大 有可能是發生在哪個步驟問題 我每次壓出的片都超級黑
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