Re: [求救] 請問MTT assay單位 OD如何轉換成VIABIL …

看板Biotech作者 (真是不可思議)時間15年前 (2009/05/18 17:30), 編輯推噓6(607)
留言13則, 5人參與, 5年前最新討論串2/2 (看更多)
※ 引述《mijawang (mjwang)》之銘言: : 想請問有做過細胞存活率測試的各位 譬如MTT WST-1等 都是測其吸光値 : 要如何將縱軸單位轉換成 cell viability(%)?? : 像我們實驗室之前作mtt 測其OD 570nm後 學長姐們都是用od來做縱軸圖 : 可是今天我做完材料細胞毒性測試 想要比較存活率 : 並以在tcps上培養且未含材料的細胞量作control 且用此control作為基準値 : 就像我在期刊上有看到 test/control * 100 : 那要如何得到縱軸cell viability(%)??是要做細胞量 v.s. OD値之間檢量線嗎? : 另外 想請問大家測MTT的時候 會有BLANK嗎? 若有 BLANK是什麼呢? : 像我們實驗室是用DMSO去溶 再分裝至96-WELL去測 所以BLANK就是DMSO這樣嗎? : 感謝各位了! : ※ 編輯: mijawang 來自: 140.120.135.124 (05/18 15:53) : 推 leoblack:MTT是定義出"相對"存活率不是"絕對"存活率~請跟control比 05/18 16:45 : → mijawang:我知道啊 所以那數値是直接OD値去除?? 05/18 16:55 : → mijawang:譬如我的CONTROL吸光値為1.0 樣品吸光値為0.8 05/18 16:56 不是這樣算喔 : → mijawang:所以CELL VIABILITY為0.8/1.0*100=80% 這樣?? 05/18 16:57 你要先作一組standard curve(問妳們家學長姐 他們一定知道) 由standard curve 計算出細胞成長的公式(我都會讓R平方值>0.9) 比方說 R2 = 0.99152446 y = 0.00005679 x + 0.08809291 control= 1.0 1.0 = 0.00005679x+0.08809291 計算出 Xcontrol sample = 0.8 0.8 = 同上 計算出 Xsample Xcontrol / Xsample = 細胞存活率 -- -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.114.44.75

05/18 17:56, , 1F
細胞生長曲線跟MTT吸光值代表細胞數是兩回事,不要混為一談
05/18 17:56, 1F

05/18 18:00, , 2F
我不懂為啥要求standard curve後下去比...
05/18 18:00, 2F

05/18 18:06, , 3F
所以?? 到底要如何才能把縱軸OD値換為cell viavility(%)?
05/18 18:06, 3F

05/18 18:07, , 4F
不曉得大家是怎樣去表示的?
05/18 18:07, 4F

05/18 18:52, , 5F
OD在某範圍內是線性的 這要試試你的cell線性範圍在哪
05/18 18:52, 5F

05/18 18:53, , 6F
在這範圍內的OD值 test/control 就能直接換算成%
05/18 18:53, 6F

05/18 18:59, , 8F
就種1盤連續稀釋的細胞 然後做OD的standard curve
05/18 18:59, 8F

05/18 19:00, , 9F
找到線性範圍 你的種的control也不能爆表
05/18 19:00, 9F

05/18 19:01, , 10F
細胞數是自己種的跟生長曲線沒關
05/18 19:01, 10F

05/18 19:24, , 11F
所有的OD都要扣掉blank的OD blank就是你的原點
05/18 19:24, 11F

11/11 01:28, , 12F
就種1盤連續稀釋的細胞 https://muxiv.com
11/11 01:28, 12F

01/03 16:55, 5年前 , 13F
所以?? 到底要如何才 http://yofuk.com
01/03 16:55, 13F
文章代碼(AID): #1A4IgsPZ (Biotech)
文章代碼(AID): #1A4IgsPZ (Biotech)