[求救] 做Western 的protein問題

看板Biotech作者 (ㄟ逼)時間17年前 (2009/03/04 21:21), 編輯推噓13(13推 0噓 5→)
留言18則, 14人參與, 7年前最新討論串1/2 (看更多)
最近做western 簡直是撞鬼了 怎麼做怎麼出問題 不過這次主要來問一下protein 的問題 就是為什麼我的protein + dye 然後弄下去煮以後 有些sample會出現一塊一塊 (或是說一坨一坨) 的...雜質還是沉澱物 害我load膠的時候卡住 而且我也很擔心這樣我蛋白濃度會不會因此改變 導致先前算好要load的量不對 這到底是為甚麼呢? 出現這種東西有關係嗎? 要怎麼解決呢? PS 我在抽protein的時候都有加proteinase inhibitor -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 203.64.247.100
推
03/04 21:30, , 1F
煮到糙揮搭了(誤)
03/04 21:30, 1F
推
03/04 21:38, , 2F
可以試試看在加sample buffer前用1ml針筒抽吸幾次
03/04 21:38, 2F
推
03/04 22:58, , 3F
sample的DNA?
03/04 22:58, 3F
推
03/04 23:00, , 4F
哪一種protein sample?
03/04 23:00, 4F
推
03/04 23:11, , 5F
dye理面的SDS沉澱了0.0?
03/04 23:11, 5F
推
03/04 23:58, , 6F
是DNA吧...碰到sample buffer會有白色一坨坨的
03/04 23:58, 6F
推
03/05 00:39, , 7F
應該是sample的DNA
03/05 00:39, 7F
推
03/05 01:27, , 8F
一樓是白癡！不曉得哪個學校的....
03/05 01:27, 8F
推
03/05 01:58, , 9F
...............................哈哈誤很大！
03/05 01:58, 9F
推
03/05 05:56, , 10F
可能是sample的genomic DNA，可以多抽吸幾次打破它，或者
03/05 05:56, 10F
→
03/05 05:57, , 11F
稀釋降低Lysis Buffer中SDS濃度，處理離心後可得較澄清
03/05 05:57, 11F
推
03/05 16:38, , 12F
一樓是在開玩笑啦 ^^""
03/05 16:38, 12F
→
03/06 01:00, , 13F
原來是DNA嗎?@@" 我的sample是細胞
03/06 01:00, 13F
推
03/06 09:23, , 14F
1F拿著"誤"的舉牌了~還是中槍~囧
03/06 09:23, 14F
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03/06 09:24, , 15F
不過~在笨笨的碩一時~真的有把蛋白煮到"糙揮搭"~囧
03/06 09:24, 15F
推
03/06 16:04, , 16F
拿去sonicate
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11/11 01:20, , 17F
可以試試看在加samp https://noxiv.com
11/11 01:20, 17F
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01/03 16:52, 7年前 , 18F
哪一種protein http://yofuk.com
01/03 16:52, 18F
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文章代碼(AID): #19he1t7q (Biotech)
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