Re: [求救] DNA定序的廠商

看板Biotech作者 (我是可憐蟲>_<...)時間17年前 (2008/12/12 23:17), 編輯推噓4(400)
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借個標題問一下, 我想板上應該有人有做過fusion protein, 而fusion protein的核酸長度應該也大多不算短, 像我現在在做的總長大約就有1900bp. 但有個問題是,我請廠商(源資)幫我從兩頭定序, 回來的結果頭尾頂多只有700bp~800bp的可信, 雖然定序的的訊號有到900bp啦,但太後面的peak看來就不可靠, 而且,就算我頭尾都定,這兩端的信號也沒overlap, 中間的base就不知到底有沒有對. 因此我想問各位有做過長片段fusion protein的, 你們在clone完後應該也會送定序吧?那有什麼方法可以確認中段base的正確性呢? 是要另外再設計primer讓廠商可以從中間定序? 還是說有廠商可以提供長片段的核酸定序服務? 還是,只看頭尾,中間就不理他了!?(不過我想應該不會是這個吧>_<) 另外再問一下,polymerase(如Taq)在進行PCR時, 是否會有愈尾端錯誤愈多的情形,還是說錯誤的發生是很平均分布的呢? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 61.64.79.241

12/12 23:25, , 1F
多訂一條primer去定序中間的部分.
12/12 23:25, 1F

12/12 23:29, , 2F
多訂一條primer請廠商定中間的序列
12/12 23:29, 2F

12/13 11:18, , 3F
多訂兩條primer去定序中間的部分
12/13 11:18, 3F

12/13 14:22, , 4F
做fusion protein...最好用pfu
12/13 14:22, 4F
文章代碼(AID): #19Ge2Aw5 (Biotech)
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