Re: [求救] 關於前列腺癌細胞LNCaP
※ 引述《tsubasawolfy (悠久の翼)》之銘言：
: ※ 引述《feshu (小飛鼠)》之銘言：
: : 請問各位大大有培養過前列腺癌細胞LNCaP的經驗嗎?
: : 能否告訴我培養這株細胞的方式，因為我沒有經驗
: : 所以最近細胞的狀況很不好，想要請教各位大大
: : 謝謝
: 這株細胞跟他的兄弟PC3比起來從小嬌生慣養
: subculture時 打散細胞不能太粗魯 要小心的沖吸沖吸(PC3拿去vortex照樣頭好壯壯)
: LNCaP因為接近正常細胞所以會難打散 耐心點慢慢打XD
: 細胞不能養太滿 大概8分滿就該分盤 因為太滿老細胞多 分盤後就會看到奇形怪狀的
: 細胞出現 (基因也變的不穩定 應該說可能跟原來的LNCaP會有所不同)
: 剛解凍的LNCaP大概要兩個兩三代後才會甦醒(會發現她突然長的很快XD)
LNCaP屬於前列腺癌前期細胞株
細胞特性屬半懸浮性的
不管在活化 繼代或是加藥處理都需要小心
換培養基的時候建議要回收懸浮的細胞
因為它不是死掉才浮起來的
尤其加藥處理特別要小心
我會建議用flask養
減少污染的機會
誠如上篇回文所言 活化的過程非常漫長
基因表現的話建議你可以看AR PSA這兩個基因
都是前列腺癌細胞會表現的基因
再來就是培養基的問題
一般在ATCC上看到的都是使用RPMI1640
這種培養基廣泛的使用在各式的細胞株
但是拿它來培養LNCaP時
需要外加glucose sodium bicarbonate(這是一定的啦) HEPES
還有一個叫做SODIUM PYRUVATE的一定要加
我試過有添加跟沒有添加的
生長上是有差異的
這些是我養的經驗
有問題寫信來問我吧
如果我幫的上忙的話^_^
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