Re: [轉錄][請益] PCR P不出來

看板Biotech作者HenDa (紅色星球椅蜘蛛人)時間17年前 (2008/10/26 12:33)推噓3(3推 0噓 1→)

留言4則, 3人參與討論串2/3 (看更多)

※ 引述《qtzbbztq (阿杰)》之銘言： : ※ [本文轉錄自 Master_D 看板] : 作者: kiki6565 () 看板: Master_D : 標題: [請益] PCR P不出來 : 時間: Sun Oct 26 00:00:19 2008 : RT-PCR後的cDNA拿來P 2.3Kbp的基因(coding region) : 試了很多次conditionc還是p不出來,也找學長姐問過了 : 都說沒p過這麼長的基因 : 想說可能是PCR步驟操作不好 : 就拿實驗室的Ppasmid(含有2Kbp某基因的Promoter)當作control試試 : 是有p出來,但是我要的還是沒出來 : 請問各位有好的建議嗎 RT-PCR用什麼當control? 至少要夾出house keeping 再者要看RT反應是用dT或hexamer 要夾完整的mRNA可能要用dT RNA denature要完全 RT酵素也要夠力才行不然無法做出太長的cDNA 個人是覺得跟PCR步驟沒什麼關係 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 118.165.16.223

推

bolly

10/26 15:58, , 1^F

10/26 15:58, 1^F

推

damyr

10/26 16:56, , 2^F

10/26 16:56, 2^F

推

cryosakura

10/27 21:06, , 3^F

10/27 21:06, 3^F