Re: [求救] RAW cells 一些問題請教
※ 引述《allergy1115 (白天彼此明爭暗鬥)》之銘言：
: 請問版上有人是正在養RAW cells, 並且剛好也在上FLOW的嗎
: 有些技術性問題想請教
: 我自己遇到的情況是
: RAW cells 會分裂(廢話, 自己罵自己), 所以在我的FSC/SSC 會出現明顯兩群細胞
: 我要染的marker, 好死不死, 只有在大size 那群細胞會表現,
沒有養過RAW cells,
不過這群小size細胞會不會是死細胞?
可以試試看過個將死細胞去掉。
因為cell line會分因為分裂變成兩群,
感覺還蠻奇怪的,
說不定是在將細胞打下來的過程中死掉了,
還是說你有做過一些serum starvation之類的處理。
: 剛分裂出來小size細胞似乎不太表現我要的marker..
: 這讓我很困擾, 因為整個population 是一樣的RAW cells,確有一部份表現一部份不表現
: 這樣要怎麼去量化我的marker表現??
: 此外的另一個問題是, 大size 的細胞, 似乎有一部份超過了FCS/SSC1000的邊線
: 請問我要怎麼把數值壓下來??
: 目前適用liner, 改用log/log 嗎??或是有人可以分享你的FSC/SSC數值給我參考嗎??
可以試試看,
也可以交叉用liner/log,
只要能gate到你要的細胞,
這只是工具而已。
: 最後一個問題,
: 我發現在不同刺激物刺激後, RAW 型態會變化, 這樣適合作MTT test 嗎?
: 因為照相不能代表很客觀的被活化, 我需要很客觀的數量化來證明
: 落落長一串, 希望有人可以幫我....謝謝
這我就不太清楚,
不過既然有在上flow,
應該可以染一些代表活化的marker,
或者是測一些cytokine的量。
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我達達的馬蹄是美麗的錯誤
我不是歸人，我是馬......
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◆ From: 203.70.125.229
推
10/27 22:00, , 1F
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