Re: [求救] 請問要如何測定人工生產蛋白質之LPS含量
※ 引述《kitchhenlin (忘)》之銘言：
: 我們是用大腸桿菌作recombinant proteins
: 但現在想要去除裡面的LPS 並在去除後測定LPS的含量
: 想請問有做過類似實驗的大家推薦好用的去除LPS的方法及測定方式
: 謝謝！ ：）
之前也曾想過要去除重組蛋白的LPS，就我知道Pierce有在賣kit(polymyxin B)
不過那種Kit回收回來的蛋白我想應該所剩無幾........
也有號稱有高回收率的，不過問到的價錢真是太貴了
後來看這篇文獻提到的方法
"Single step protocol to purify recombinant proteins with low endotoxin
contents"
Protein Expr Purif. 2006 Apr；46(2):483-8
感覺好像還不錯，他們只是在wash時加入非離子界面活性劑便去掉了大部分內毒素!
同時有高的蛋白回收率~(缺點是可能要去冷房做純化..)
有興趣可以試試!
我本身是用chromogenic assay來定量內毒素~100多個test kit，15k左右~30分鐘
就可以測出結果~應該是最快的
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