Re: [求救]PCNA及Ki67的IHC
※ 引述《adamjr (hgd)》之銘言:
: 請問
: 有人做過這兩個抗體的組織染色嗎?
: 我用ab cam的都染不出來耶!
: 可否請有經驗的人分享一下呢?
: 或是有人做過B6的脾臟免疫染色?
: 這個組織本身好染嗎?
: 求求各位幫忙,謝謝!
我不是原po
但是最近用DAKO 染Ki67(MIB-1)也是染不出來
染的是neurofibroma
以下我只列出protocol中比較可能做變動的部分
在target retrieval的部分是用DAKO target retrieval buffer pH9
在水浴槽隔水加熱煮20min
1抗(1:100) 4度C O.N.
DAB呈色 10min→但是完全沒有顏色,後來在補染5min,還是沒有
那一次同時染另外一支抗體,所以我很確信該加的我都有加
因為另外一支有染出來
因為1抗的部分已經是O.N.
DAB呈色的部分似乎也沒有帶大的改善
所以覺得target retrieval的部分似乎是要調整
想請教有染過Ki67的各位在target retrieval都怎麼處理??
謝謝大家...
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◆ From: 61.229.225.120
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