Re: [求救]PCNA及Ki67的IHC

看板Biotech作者 (keep the faith)時間16年前 (2008/05/04 09:27), 編輯推噓2(209)
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※ 引述《adamjr (hgd)》之銘言: : 請問 : 有人做過這兩個抗體的組織染色嗎? : 我用ab cam的都染不出來耶! : 可否請有經驗的人分享一下呢? : 或是有人做過B6的脾臟免疫染色? : 這個組織本身好染嗎? : 求求各位幫忙,謝謝! 我不是原po 但是最近用DAKO 染Ki67(MIB-1)也是染不出來 染的是neurofibroma 以下我只列出protocol中比較可能做變動的部分 在target retrieval的部分是用DAKO target retrieval buffer pH9 在水浴槽隔水加熱煮20min 1抗(1:100) 4度C O.N. DAB呈色 10min→但是完全沒有顏色,後來在補染5min,還是沒有 那一次同時染另外一支抗體,所以我很確信該加的我都有加 因為另外一支有染出來 因為1抗的部分已經是O.N. DAB呈色的部分似乎也沒有帶大的改善 所以覺得target retrieval的部分似乎是要調整 想請教有染過Ki67的各位在target retrieval都怎麼處理?? 謝謝大家... -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 61.229.225.120

05/04 23:47, , 1F
加H2O2步驟處理??
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05/04 23:49, , 2F
有的熱處理我會用autoclave
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05/05 19:04, , 3F
0.3% H2O2 10min
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05/05 19:05, , 4F
是有想過,但擔心tissue剝落
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05/06 09:12, , 5F
擔心剝落片子切完要用oven烘乾一下
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05/06 09:13, , 6F
另外看是不是脫蠟不完全,Xylin Alc有時失效沒發現
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05/06 09:14, , 7F
臘沒脫完全也可能會抗體上不去
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05/06 09:15, , 8F
最後 可能 抗體壞了...........
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05/06 18:00, , 9F
是有的,切完37度ON..但還是有些切片會有剝落的情形
05/06 18:00, 9F

05/06 18:03, , 10F
送切片室切的..所以品質我沒法掌控....
05/06 18:03, 10F

05/06 18:04, , 11F
謝謝~我會在試試看的...
05/06 18:04, 11F
文章代碼(AID): #187H45Em (Biotech)
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