Re: [求救] 請問Trypsine在cell passage時的作用……
※ 引述《desirable.bbs@ptt.cc (迷途小書僮)》之銘言：
我就我知道的部分回答一下好了...
如果有錯請各位大大指正
Q: 我想請教大家，有沒有人知道在 cell passage 過程中，加入 Trypsine 的詳細原理？
我查了好一陣子，只推測可能和破壞細胞的 adhesion 有關，
同時知道 Trypsine 作用的位置在 Lyesine 和 Argnine 的酸基上，
A: Trypsine可以作用的位子你也知道嘛...一般蛋白質都會含有這兩種胺基酸
因此會被Trypsine分解，當然細胞和胞外基質作用的相關蛋白質也會被分解掉。
Q: 目前看到的說明，還有一些是加入EDTA去螯合二價的金屬離子，
但 Trypsine 的原理似乎不是如此……？
A: 細胞和細胞間的interaction是透過cadherin的作用，cadherin和cadherin會透過鈣離子
互相作用，因此trypsine中加入EDTA可以螯合二價的鈣離子，讓細胞和細胞失去彼此的
interaction，而cadherin又可以被trypsine分解
既然cell-matrix 和 cell-cell 的interaction都被壞了細胞便可以順利的被
懸浮起來
在繼代的過程中可以按照比例再種回培養皿中，而這些原本被分解掉的蛋白，
也會隨著時間再度表現回細胞膜上，最終回復到原本的狀態。
不知道這樣有沒有回答到你的問題?
--
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 220.131.228.230
--
/ ／ ／ ＼ヽ
| | ／ ー ー| |
| | | ∩ ∩（| ／￣￣￣￣￣￣￣￣￣
| | |''' ▽ '''|＜ 大好き!
| Λ|＼ ＿＿／|/ ＼＿＿＿＿＿＿
| | |/ / <V> i ￣￣￣
--
┌┼ Origin: 國立中興大學˙中興生科 bbs.life.nchu.edu.tw
└┘ Author: ketalo 從 219-84-187-31-adsl-tai.dynamic.so-net.net.tw 發表
討論串 (同標題文章)