Re: [討論] 細胞transfection之後reseeding
※ 引述《bicon.bbs@ptt.cc (不以物喜不以己悲)》之銘言:
> 我用293A cells
> 第一天 1 x 10六次方 seeding 在10cm dish
> 第二天 transfection (用CaCl2)
> 第三天 reseeding to 12 wells plate
> 遇到的問題是 第三天 加入trypsin後 細胞仍然貼的很緊不下來
> 大家都怎麻處理呢? 有人用刮的過嗎?
> 謝謝大家
用刮的應該是取 lysate 用的...
可以改進的地方:
舊的培養液抽掉以後 用 PBS 洗兩三次 確定洗淨絕大部分的培養液
trypsin 回溫到 37C
trypsinize 放到 incubator 裡面一分鐘或更久
再不行,加 EDTA 試試看(詳細 propocol 自己上網查)
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莫非定律:
到了期末才會想起期初曾選了一門課卻一直沒去上
補充定律:
拿到成績單才發現上了一學期的課忘了去考期末考
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※ Origin: 生命科學 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw>
◆ From: cpe-66-61-25-6.neo.res.rr.com
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12/27 23:58, , 1F
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