Re: [求救]是否有dam-/dcm- orJM110 competent cell.
其實未必真的會發生甲基化耶~
因為我也是這個切位
不巧用的E.coli是DH5 alpha
本來還以為駐定失敗勒~
沒想到還是順利進行
之後挑出的colony也double check過沒有錯
不過老實說我也滿疑惑怎麼沒被甲基化的 @@
※ 引述《countonme (that's just me)》之銘言：
: 請問各位先賢是否有dam-/dcm- competent cell
: 或是JM110 competent cell可以給我？
: 我遇到一個construction問題
: XbaI為dam sensitive，其辨認的位子為T^CTAGA
: 如果此序列後面又是接TC
: RE site中的"A"會被methylation
: T^CTAGA --> T^CTAG(meA)＠A 那麼XbaI就切不動。
: 好死不死我的plasmid中的XbaI site就是 T^CTAGA TC
: 然而XbaI又沒有其他的isoshizomers，而且我又一定得用XbaI切。
: 且我的plasmid是用正常的E.coli放大出來。
: 所以只要能被甲基化的位子，一定能被甲基化。
: 所以我想請問各位先賢是否有dam-/dcm- competent cell
: 或是JM110 competent cell可以給我？
: 我在新竹讀書，真的很感謝各位的幫忙。
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