Re: 菌液養太久(菌死光)plasmid會不會不見？

看板Biotech作者 (##)時間18年前 (2007/12/06 01:03), 編輯推噓8(8推 0噓 8→)
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因為Amp在室溫之下太久是會失去功能的 所以養菌養太久的時候 37C 的高溫就會把Amp給弄壞掉 那就沒辦法提供有利的條件讓有plasmid的那些菌生長 既然沒什麼好處的話 那plasmid的製造就會變沒啦 （plasmid上面有Amp resistance的基因） 大致上我想應該就是這樣吧 說得不是很清楚 還有一個可能就是你的菌死了 如果要永久保存的話 請加Glycerol (大約一比一） 然後冰到 -80 C 要用的時候抽個 5 lambda 出來就可以養 成 10 ml 左右的 culture 了 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 124.185.130.232 ※ 編輯: buterscotch 來自: 124.185.130.232 (12/06 01:06)
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12/06 01:06, , 1F
我瞭解您的意思，但是已經產生具有plasmid的菌是不是會在死
12/06 01:06, 1F
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12/06 01:07, , 2F
亡後，plasmid也會被分解呢？ 所以之前產生的也抽不到
12/06 01:07, 2F
推
12/06 02:35, , 3F
我印象中保存plasmid的菌株 有把一些DNAse基因KO
12/06 02:35, 3F
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12/06 02:36, , 4F
所以你說養太久抽不到 其實我覺得不太可能
12/06 02:36, 4F
推
12/06 20:13, , 5F
就抗生素熱掛了,菌不再需要plasimd保命,於是就被踢出菌外
12/06 20:13, 5F
推
12/07 00:22, , 6F
但我還是不認為養48小時就會完全抽不到
12/07 00:22, 6F
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12/07 00:24, , 7F
你說的事情會發生 但是要到完全抽不到 至少要轉養到不含amp
12/07 00:24, 7F
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12/07 00:24, , 8F
的LB 2-3代以上 才會大部分的菌都沒有plasmid
12/07 00:24, 8F
推
12/07 00:27, , 9F
^^第
12/07 00:27, 9F
推
12/07 21:21, , 10F
請問 若將小量菌貯存在4度C,貯存多久算老化?
12/07 21:21, 10F
推
12/07 22:50, , 11F
存在 4C 一星期左右應該都沒問題。然後在沒 Amp 的 LB
12/07 22:50, 11F
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12/07 22:50, , 12F
的菌會沒有plasmid是我親身的體驗。 :P
12/07 22:50, 12F
推
12/08 00:18, , 13F
我也曾經忘記加Amp養菌 但是還是有抽到plasmid
12/08 00:18, 13F
推
12/08 10:45, , 14F
結果我送新鮮的菌液給他們 就定出來了..可見真的是amp熱掛
12/08 10:45, 14F
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12/08 10:45, , 15F
造成雜菌叢生 使原本目標菌種被抑制掉，或者是plasmid被吐出
12/08 10:45, 15F
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12/08 10:46, , 16F
菌體 接著被分解了
12/08 10:46, 16F
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文章代碼(AID): #17Ljdx5y (Biotech)
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