Re: [方法] degenerating primers

看板Biotech作者 (lenz)時間18年前 (2007/12/05 09:15), 編輯推噓0(000)
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應用 抗體研究方面的應用我不是很清楚,不過一般來說最常用來釣基因。 假設你想要研究一個在該物種沒有被研究過的基因,流程如下: 蛋白質體 > 質譜比對 > 有興趣的蛋白 > 資料庫序列比對 > 找出此蛋白的保守片段 (conserved domain) > 用此片段設計 degenerate primers PCR 放大該基因 原理 其中因為氨基酸的 codon 有很多種可能,所以要排列組合作出 各種可能的 primers,故稱之。 邏輯 保守片段一般來說是同一類蛋白質皆具有,且變異性最小的區域。 有錯請指正 ※ 引述《chengtachun (>0<)》之銘言: : ※ 引述《er230 (snow)》之銘言: : : 請問有人知道這個方法的的原理和應用嗎 : : 最近需要接觸這方面 : : 但卻找不太到相關參考資料 : : thx~ : 用來放大一段有規則的基因,我舉個例子會清楚點 : 例:你的目標基因X,Y,Z sequence如下 : type 1 :XXXXXXXATCGATCGATCGATCG..... : type 2 :YYYYYYYACCGACCGACCGACCG..... : type 3 :ZZZZZZZATGGATGGATGGATGG..... : primer:ATCGATCGATCGATCG..... : CG CG CG CG : 你不知道X,Y,Z的DNA sequence,或是X,Y,Z間的變異性太大很難設計primer : 那就後(前)面一點點發現DNA sequence有點規, : 就設計像上面的primer一樣,跟廠商說你要某個bp要同時有多種nucleotide : ,這樣就是degenerating primer : 常用在放大抗體的variable region, : 方法就是由constant region設計primer -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.127.160.142
文章代碼(AID): #17LVkN26 (Biotech)
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