[求救] 有關HEK293 transfect的實驗.....

看板Biotech作者 (想念我的單眼皮男孩~敏湖)時間18年前 (2007/11/15 17:39), 編輯推噓8(8推 0噓 3→)
留言11則, 5人參與, 最新討論串1/2 (看更多)
我最近用Hek293細胞做實驗 這株細胞是不是本身就很敏感? 非常容易飄起來.... 今天我seeding 4x10的5次方在6well盤中 用2ug DNA:5ul lipo做 剛剛4小時去看....大部分都飄起來了 現在頭很痛~~~~ 這株細胞transfect方面是不是有些需注意的地方？ 例如細胞數量...lipo的使用...後續的方法 不知道哪位可以大約幫我解惑 謝謝@_@ -- -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.128.139.89
推
11/15 18:05, , 1F
你用lipo搞293當然飄的兇 用calcium phosphate
11/15 18:05, 1F
推
11/15 18:11, , 2F
而且你的lipo好像用的太多了 for 6-well
11/15 18:11, 2F
推
11/15 18:24, , 3F
那有什麼好建議的...因為我們家都是用lipo...
11/15 18:24, 3F
→
11/15 18:25, , 4F
如果還是要用LIPO的話,就只能這樣嗎？
11/15 18:25, 4F
推
11/15 18:46, , 5F
CaCl2和HBS都可以自己配
11/15 18:46, 5F
推
11/15 20:29, , 6F
改用ad293如何?我覺得ad比Hek不容易飄耶....
11/15 20:29, 6F
推
11/15 21:07, , 7F
可以用1ugDNA:1.5ul lipo for 6-well, good luck!
11/15 21:07, 7F
推
11/15 22:38, , 8F
我DNA跟lipo的比例為1:1 HEK293非常好transfection
11/15 22:38, 8F
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11/15 22:40, , 9F
對溫度敏感 加溫使用的buffer/medium並從邊緣加可改善飄起뀠
11/15 22:40, 9F
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11/15 23:06, , 10F
謝謝大家的幫忙,那想請問大約反應多久補MEDIUM呢?
11/15 23:06, 10F
推
11/16 19:12, , 11F
4 hr to O/N 可補medium
11/16 19:12, 11F
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文章代碼(AID): #17F1FWHC (Biotech)
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