Re: [求救] membrane protein的coIP方法
※ 引述《poblue (退一步)》之銘言:
: 這陣子都在做 membrane protein 的coIP
: 可是奇怪的是 IP的時候都抓的到 但是coIP怎麼抓都抓不到
: 因為IP沒有問題 代表抗體或是buffer都沒有問題
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: 所以想了很久 也換了很多種作法
: 最近想到 會不會是因為這個protei是位在membrane上面的關係
: 在IP處理過程中把他給洗掉或是其他原因
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: 想請教版上曾做過membrane coIP的大大們
: 提供我一點想法或作法 或是借我參考protocol
: 我目前還想不出到底哪裡出錯
: 謝謝大家的指導
有這種可能,但我的直覺是:
antibody的epitope determined site 是protein-protein interaction的位置;
所以你的IP是ok的,但是Co-IP卻做不出來……
p.s.我之前做的Co-IP是her2-her3 interaction(兩個都是membrane protein)
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勉強3行
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