Re: [求救] 關於non-reducing gel
※ 引述《realm (realm)》之銘言：
: 最近要研究一個protein的oligomerization (透過disulfide bonds...這是已知的...)
: 所以想要跑non-reducing gel...
: 查過一些線上和paper...
: 感覺起來, 只要sample loading buffer不要加reducing agents (如BME或DTT) 即可,
: 所跑得膠似乎依然是一般的SDS-PAGE
: 不過跑完看到的pattern和跑一般SDS-PAGE似乎沒有什麼兩樣...
: 所以有點疑惑, 是否應該要跑native gel...即不含SDS的膠...
: 想請問是否有人跑過non-reducing gel...
: 是否可以分享一下...先謝謝囉~~:)
加 DTT或2MB 是reduce (打開disulfide bond)
加 SDS和加熱 是denature (打開二級結構)
如果你要跑non-reducing，
loading buffer以及lysis buffer 不要加 DTT 或2MB 就好了
其他跟跑一般的 reducing gel 一樣
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◆ From: 140.114.100.190
※ 編輯: HUVEC 來自: 140.114.100.190 (09/19 21:32)
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